微量分光光度计

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奥盛Nano-300微量分光光度计

与国外某知名品牌dsDNA检测结果的比较


 本公司推出的Nano-300微量分光光度计(图1),能够快速检测核酸、蛋白质、细胞溶液,每次检测仅需0.5μl-2μl 样品。为检测其准确性和稳定性,现将Nano-300与国外某知名品牌最新产品做dsDNA检测对比。


图1。 Nano-300微量分光光度计


1.实验方法

首先将dsDNA标品从最高浓度用TE缓冲液梯度稀释,每次稀释2倍,共稀释9次。在两款仪器上检测dsDNA样品,每个样品重复检测4次,记录数据,并计算核酸浓度的平均值(mean)和标准偏差(SD)和变异系数(CV)。


2.实验结果

 2.1检测界面

  Nano-300和国外品牌均采用图标化设计软件界面,检测界面直接显示检测数据及样品的峰型,直观读出样品的浓度、OD230、OD260、OD280以及OD260与OD230、OD280的比值,非常容易得出样品是否有杂峰,是否含有杂质。


2。2准确性结果比较

 我们检测了9个稀释后的dsDNA样品,并计算dsDNA浓度的平均值和标准偏差(图3)。从图中可以看出两款仪器检测的dsDNA浓度趋势符合稀释后的浓度梯度,而且对比这两款仪器的检测结果,在不同浓度样品中dsDNA浓度相差不大。

图3.样品浓度平均值对比

(由于我们不知道样品的浓度,因此我们以样品的浓度倍数作为横坐标)


2.3线性结果比较

 将检测数据进行线性拟合,发现两款仪器的R2是一致的(图4),结果表明Nano-300与国外品牌检测结果一样具有线性。

  

 图4。 Nano-300(左)和国外品牌(右)线性对比


2.4稳定性结果比较

 两款仪器再稳定性方面表现(表1),国外品牌在样品浓度低于10ng/μl时CV值为3。78%,CV值随着检测浓度的上升而降低,当浓度高于50ng/μl后,CV值小于1%;Nano-300在各个浓度范围表现良好,CV值最高也仅为2。02%。上述数据显示,Nano-300检测稳定性在低浓度时要略好于国外品牌。


表1. Nano-300和国外品牌检测结果对比


2.5OD260/OD280比值比较

 表3是OD260/OD280、OD260/OD230结果比较,从总体上看,这两款仪器的两个比值相差不大。Nano-300检测结果OD260/OD280比值基本上在1.8~1.9之间;国外品牌检测结果OD260/OD280比值较高,在1.9附近。但在低浓度时,Nano-300稳定性优于国外品牌。两者OD260/OD230比值及稳定性均差异不大。


表3. OD260/OD280、OD260/OD230结果比较


3。结论

 a.两款仪器操作界面均采用图形化,但是国外品牌在操作便捷性以及结果处理上要优于Nano-300;

 b.这两款仪器在检测dsDNA时准确性和稳定性接近,且线性良好,在低浓度时,Nano-300的稳定性要优于国外品牌;

 c.在接近检测极限时,两者都不能很真实的反映样品的纯度,随着浓度的上升仪器稳定性、结果可靠性增加。


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