酶标仪常见应用简介--ELISA

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酶标仪常见应用简介—ELISA



 ELISA(Enzyme-linked Immunosorbent assy),中文名:酶联免疫吸附实验,免疫学中经典的技术之一。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。


 进行检测时,样品中的受检物质(抗原或抗体)与固相载体表面的抗原或抗体特异性结合。通过洗板除去非结合物,再加入酶标记的抗原或抗体,此时,能固定下来的酶量与样品中被检物质的量相关。通过加入与酶反应的底物后显色,根据颜色的深浅可以判断样品中物质的含量,进行定性或定量的分析。


 根据试剂的来源和标本的性状及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法:


1.双抗体夹心法测抗原
 针对抗原分子上两个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体。适用于测定二价或二价以上的大分子抗原,不适用于测定半抗原及小分子单价抗原,因其不能形成两位点夹心。


2。竞争法测抗原
 首先将特异性抗体包被于固相载体表面,经洗涤后分成两组:一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液,另一组只加酶标记抗原,经孵育洗涤后加底物显色,这两组底物降解量之差,即为所要测定的未知抗原的量。此方法测定的抗原只要有一个结合部位即可,对小分子抗原如激素和药物类的测定常用此法。优点是快,缺点是需要较多量的酶标记抗原。

 



3.免疫抑制法测抗原
 被检标本对底物显色的抑制程度与标本中所含抗原的量成正比,二者之差即为预测抗原的量。

 


4.间接法测抗体
 是检测抗体常用的方法,原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体。
 

 
  本法只要更换不同的固相抗原,可以用一种酶标抗体检测各种与抗原相应的抗体。主要用于对病原体的检测而进行传染病的诊断。

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此文关键词:酶标仪
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